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免疫層析分析技術(shù)快速檢測(cè)谷物中的黃曲霉B1
時(shí)間:2014-07-31 17:40:19 作者:管理員 來源: 點(diǎn)擊:1172次

黃曲霉毒素 B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性最強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素 B1 對(duì)人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉毒素 B1 是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。

本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù),通過單克隆抗體競爭結(jié)合 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)(T)的 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗 AFB1 單克隆抗體。

實(shí)驗(yàn)方法:

一、樣品制備

取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩,準(zhǔn)確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min。4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液。根據(jù)樣品的種類按以下規(guī)定的稀釋液量,用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,徹底溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液??紤]不同樣品對(duì)黃曲霉毒素 B1 的最高含量要求,請(qǐng)參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體:

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1. 在進(jìn)行檢測(cè)前先完整閱讀使用說明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫;

2. 從原包裝袋中取出試紙卡,打開后平放在桌面上,請(qǐng)?jiān)?1 小時(shí)內(nèi)盡快使用;

3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加 3 滴于加樣孔中,加樣后開始計(jì)時(shí);

4. 結(jié)果應(yīng)在 10min 內(nèi)讀取,超過 12min 的時(shí)間判讀無效。

三、結(jié)果判定

1. 陽性:位置 C 顯示出紅色線條,而位置 T 不顯色時(shí),或者位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 顯示顏色非常模糊時(shí),判為陽性。陽性結(jié)果表明:AFB1 含量超過樣品允許量。

2. 陰性:位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 同時(shí)顯示出紅色線條,且 T 線顏色接近 C 線或者深于 C 線時(shí),判為陰性。陰性結(jié)果表明:AFB1 含量低于

樣品允許量。

3. 無效:位置 C 不顯示出紅色線條,而位置 T 顯示出紅色線條,該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測(cè)試。


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